กรุณาใช้ตัวระบุนี้เพื่ออ้างอิงหรือเชื่อมต่อรายการนี้: https://buuir.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/1819
ระเบียนเมทาดาทาแบบเต็ม
ฟิลด์ DC ค่าภาษา
dc.contributor.authorพรอนันต์ เกื้อไข่th
dc.contributor.otherมหาวิทยาลัยบูรพา. คณะสหเวชศาสตร์
dc.date.accessioned2019-03-25T09:09:51Z
dc.date.available2019-03-25T09:09:51Z
dc.date.issued2558
dc.identifier.urihttp://dspace.lib.buu.ac.th/xmlui/handle/1234567890/1819
dc.description.abstractFasciola gigantica cathepsinL, B (CathL, CathB) จัดอยู่ในกลุ่มเอนไซม์ย่อยสลายโปรตีนที่มีความสำคัญ มีการแสดงออกมากในเซลล์เยื่อบุทางเดินอาหาร และปล่อยสู่สารที่พยาธิหลั่งออกมา (ES product) ชนิดของ CathL และ B ที่แตกต่างกันจะมีการแสดงออกทั้งในตัวอ่อนระยะแรก ๆ และตัวเต็มวัยของพยาธิสำหรับการเคลื่อนที่และย่อยอาหาร ดังนั้น โปรตีน CathL และ B น่าจะเป็นเป้าหมายสำหรับการผลิตวัคซีนป้องกันการติดเชื้อพยาธิใบไม้ตับ F. gigantica ในการศึกษาครั้งนี้ มีการผลิต Recombinant pro-F.gigantica CatL1 (rproFgCatL1), recombinant mature F.gigantica CatL1 (rmatFgCatL1), CathL1H, CathL1G, CathB2 ในแบคทีเรียสายพันธ์ Escherichia coli BL21 ซึ่งมีมวลโมเลกุล เท่ากับ 30, 25, 25, 25, 28 กิโลดาลตัน ตามลำดับ ในการทดสอบวัคซีนของโปรตีน rproFgCathL1 และ rmatFgCathL1 ใช้หนูสายพันธ์ Imprinting Control Region (ICR) กลุ่มละ 10 ตัว โดยมีการฉีดโปรตีนครั้งละ 50 ไมโครลิตร เข้าใต้ผิวหนัง หลังจากการฉีดกระตุ้นครั้งสุดท้าย 2 สัปดาห์ ได้ทาให้หนูติดเชื้อโดยป้อนตัวอ่อนพยาธิระยะติดต่อ (metacercariae) ตัวละ 15 metacercariae ซึ่งผลการทดสอบวัคซีนมีการแสดงระดับการป้องกันการติดเชื้อในกลุ่ม rproFgCatL1 และ rmatFgCatL1 เท่ากับ ร้อยละ 39.1, 41.7 และ 44.9, 47.2 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม non vaccinated-infected และ adjuvant-infected controls ตามลำดับ แอนติบอดีในกลุ่มที่ฉีดกระตุ้นด้วยโปรตีนมีการทำปฏิกิริยากับ newly excysted juveniles (NEJ), 4-week-old juveniles and the ES products of 4 week-old juveniles หลังจากทดสอบโดยวิธี immunoblotting และพบว่าในกลุ่มที่ฉีดกระตุ้นด้วยโปรตีนมีการตอบสนองทั้ง Th1 และ Th2 ซึ่งสอดคล้องกับระดับแอนติบอดี IgG1 และ IgG2a ที่เพิ่มขึ้น ระดับของเอนไซม์ตับ aspartate aminotransferase (AST) และ alanine transaminase (ALT) ในกลุ่ม rmatFgCathL1 แสดงให้เห็นการลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่ม rproFgCathL1 ซึ่งแสดงให้เห็นว่าหนูกลุ่ม rmatFgCathL1 ลดความเสียหายของเนื้อเยื่อตับ รอยโรคที่เกิดกับตับในกลุ่มวัคซีนลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่า โปรตีน rFgCathL1 มีศักยภาพในการเป็นวัคซีนป้องกันพยาธิใบไม้ตับ F. gigantica และอาจจะมีการทดสอบในสัตว์เคี้ยวเอื้องและมนุษย์ต่อไปth_TH
dc.description.sponsorshipโครงการวิจัยประเภทงบประมาณเงินรายได้จากเงินอุดหนุนรัฐบาล (งบประมาณแผ่นดิน) ประจำปีงบประมาณ พ.ศ. 2558en
dc.language.isothth_TH
dc.publisherคณะสหเวชศาสตร์. มหาวิทยาลัยบูรพาth_TH
dc.subjectวัคซีนth_TH
dc.subjectโรคพยาธิใบไม้ตับth_TH
dc.subjectสาขาวิทยาศาสตร์การแพทย์th_TH
dc.titleการพัฒนาวัคซีนจากแอนติเจนในกลุ่มเอนไซม์ย่อยสลายโปรตีนสำหรับโรคพยาธิใบไม้ตับth_TH
dc.title.alternativeDevelopments of the vaccines using protease enzymes for fasciolosisen
dc.typeงานวิจัย
dc.author.emailpornanan@buu.ac.th
dc.year2558
dc.description.abstractalternativeIn Fasciola gigantica cathepsin L and B (CatL, CathB) are a family of predominant proteases that is expressed in caecal epithelial cells and secreted into the excretory-secretory products (ES). CatL and CathB isotypes are expressed in both early and late stages of the life cycle and the parasites use them for migration and digestion. Therefore, CatL and B are a plausible target for vaccination against this parasite. Recombinant pro-F.gigantica CatL1 (rproFgCatL1), recombinant mature F.gigantica CatL1 (rmatFgCatL1), recombinant mature F.gigantica CatL1G (rmatFgCatL1G), recombinant mature F.gigantica CatL1H (rmatFgCatL1H) and recombinant mature F.gigantica CatB2 (rmatFgCatB2) were expressed in Escherichia coli BL21 at molecular weight 30, 25, 25, 25, 28 kDa, respectively. The vaccination was performed in Imprinting Control Region (ICR) mice (n=10) by subcutaneous injection with 50 μg of rproFgCatL1 and rmatFgCatL1 combined with Freund‖s adjuvant. Two weeks after the second boost, mice were infected with 15 metacercariae by the oral route. The level of protection of rproFgCatL1 and rmatFgCatL1 vaccines was estimated to be 39.1, 41.7% and 44.9, 47.2% when compared with non vaccinated-infected and adjuvant-infected controls, respectively. Antibodies in the immune sera of vaccinated mice were shown by immuno-blotting to react with the native FgCatL1 in the extract of newly excysted juveniles (NEJ), 4-week-old juveniles and the ES products of 4 week-old juveniles. By determining the levels of IgG1 and IgG2a in the immune sera, which are indicative of Th2 and Th1 immune response, respectively, it was found that both Th1 and Th2 responses were significantly increased in rproFgCatL1- and rmatFgCatL1-immunized groups compared with the control groups, with higher levels of Th2 (IgG1) than Th1 (IgG2a). The levels of serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine transaminase (ALT) in rmatFgCatL1-immunized group showed a significant decrease when compared to rproFgCatL1-immunized group, indicating that rmatFgCatL1-vaccinated mice had reduced liver parenchyma damage. The pathological lesions of liver in vaccinated groups were significantly decreased when compared with control groups. This study indicates that rFgCatL1 has a potential as a vaccine candidate against F. gigantica in mice, and this potential will be tested in ruminantsen
ปรากฏในกลุ่มข้อมูล:รายงานการวิจัย (Research Reports)

แฟ้มในรายการข้อมูลนี้:
แฟ้ม ขนาดรูปแบบ 
2564_137.pdf1.11 MBAdobe PDFดู/เปิด


รายการทั้งหมดในระบบคิดีได้รับการคุ้มครองลิขสิทธิ์ มีการสงวนสิทธิ์เว้นแต่ที่ระบุไว้เป็นอื่น